5!合理计算灭菌时间灭菌时间包括：穿透时间，从锅内达到灭菌温度开始到锅内难达到的部位也达到此温度所需要的时间；维持时间，即杀灭微生物所需要的时间，一般以杀灭嗜热脂肪杆菌芽胞所需时间来表示；安全时间，为使灭菌得到确切保证所需要增加的时间，一般为热死亡时间的一半，其长短视消毒物品而定!对易导热的金属器材的灭菌，不需要安全时间。在灭菌时间内，要注意观察压力表，以保持规定的压力，维持到灭菌时间为止。在灭菌过程中，如有压力、温度下降，应重新升温升压，重新计时！
物品包装用线绳捆扎，以不松动散开为宜，不宜过紧!使用容器盛装时，选用既可阻挡外界微生物侵入，又有较好的蒸汽穿透性的容器，如特制的注射器灭菌盒、装敷料的贮槽等！3.消毒物品装放应合理消毒锅内物品不能过挤，不能超过锅内容量!尽量将同类物品装在同一锅内灭菌。若有不同类物品装放在一起，应以难达到灭菌物品的所需温度和时间为准.物品装放时，上下左右均应交叉错开，留出缝隙，使蒸汽容易穿透。大消毒包应立着放上层，小包放下层，布类和金属类物品同时灭菌时，应将金属类物品包放在下层，使两者受热基本一致，并防止金属物品灭菌中产生的冷凝水弄湿包布。
高压蒸汽灭菌器推荐
取无菌物品时，要严格无菌操作，开盖物品先将盖盖好，贮槽关闭好通气孔.同时应分类放置，顺序发放取用！8。防止超热蒸汽!超热蒸汽温度虽高，但像空气一样，遇到消毒物品时不能凝成水，不能释放潜热，所以对灭菌不利！防止超热的办法是使用外源蒸汽灭菌器时，不要使夹层的温度高于消毒室的温度，两者应相近不要使压力过高的蒸汽进入消毒室内；灭菌时不要先用压力高的蒸汽加热到要求温度，然后再降至正常压力!9！高压灭菌后不变质的物品如无菌水、栽培介质、接种用具，可以延长灭菌时间或提高压力。
2!可燃性物质：钾、钠、黄磷、磷、硫化物、红磷!明胶、碳化钙（电石）、氧化钙（石灰），镁粉，连二亚硫酸钠（保险粉）.3.氧化剂：氯化钾，氯化钠，氯化铵和其他氯化物！其他高氯化物（粉剂）！硝酸钠，其他硝酸物！过氧化钠其他无机过氧化物。亚氯酸钠和其他亚氯化物，次氯酸钙和其他次氯酸物.4.易燃物质：汽油，乙醛（醋醛），氧化丙稀，环氧丙烷，二硫化碳，和其他燃点在-30℃～0℃间的物质。甲醇，乙醇，二甲苯，苄基，乙酸苄酯，和其他燃点在0℃～30℃之间的物质（醇类）。
6！开盖操作达到灭菌时间后即可切断电源，在压力降到0！05MPa，可缓慢放出蒸气，注意不要使压力降低太快，以致引起激烈的减压沸腾，使容器中的液体四溢！当压力降到零后才能开盖，取出培养基摆在平台上以待冷凝，不可久不放气，否则容易引起培养基成分变化以至无法制作斜面培养基!如果因为久不放气导致锅炉内产生负压、盖子打不开，可以将放气阀打开，让空气进入，内外压力平衡后盖子就可以打开了。7.灭菌后操作要求消毒物品干燥后检查指示剂，当达到灭菌要求时可出锅!
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