溶酶体的荧光成像和线粒体共定位成像结果显示,AIPH/MSN-TPP@Lipo/DTX-FA纳米粒能够实现溶酶体逃逸并且在线粒体内有效聚集。细胞内烷基自由基的检测、线粒体膜电位的检测、细胞色素C的释放和单细胞凝胶电泳实验结果表明,AIPH/MSN-TPP@Lipo/DTX-FA能够在MCF-7细胞内产生烷基自由基并损伤线粒体,引起线粒体膜电位下降,导致细胞色素C等物质被释放到细胞质中,对DNA造成损伤.
基于此,本课题构建了一种线粒体温度激活的自由基爆发式逐级靶向纳米粒(AIPH/MSN-TPP@Lipo/DTX-FA),该给药系统主要具有以下优势:(1)2,2-氮杂双(2-咪唑啉)二盐酸盐(2,2-azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane]dihydrochloride,AIPH)在热刺激下可快速分解产生具有细胞毒性的烷基自由基,该分解过程不依赖于氧气;(2)利用细胞器自身的特性触发烷基自由基的生成,克服了以自由基为基础的物理刺激响应性治疗策略的局限性;(3)将两种作用机制不同的药物联合用于肿瘤的治疗:多烯紫杉醇(Docetaxel,DTX)通过诱导Bcl-2抗凋亡蛋白表达下调,促进AIPH所引发的线粒体凋亡通路;(4)逐级靶向纳米粒具有叶酸(Folicacid,FA)和三本基膦(Triphenylphosphine,TPP)两种靶向基团,有助于实现DTX和AIPH的精，准靶向释放,在大程度上发挥两者的抗肿瘤作用,有利于减小药物的副作用.
细胞周期和细胞凋亡实验结果显示,AIPH/MSN-TPP@Lipo/DTX-FA能够将细胞周期阻滞于S期和G2/M期,主要通过诱导细胞凋亡而发挥有效的抗肿瘤作用.Westernblotting实验结果验证了DTX和AIPH的联合抗肿瘤作用机制。2,2-氮杂双(2-咪唑啉)二盐酸盐含氧稀土金属氢化物YHxOy是一种新发现的具有快速光响应的光致变色材料.尽管其制备方法、光学性质和结构特征已被广泛研究，但YHxOy中的光致变色机理仍然未知!
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实验中我们发现AIPH同时具有温度敏感性和酸敏感性,且AIPH的分解过程具有时间依赖性。氮气吸附-脱附测定、傅里叶变换红外光谱(Fouriertransforminfrared,FT-IR)和透射电子显微镜(Transmissionelectronmicroscope,TEM)等实验结果表明了纳米粒合成过程中各阶段产物的成功制备!粒径分布和Zeta电位结果表明,所制备的AIPH/MSN-TPP@Lipo/DTX-FA的平均粒径为87！
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