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DNA提取流程_dna提取

DNA提取流程_dna提取

样本要求及推荐使用的试剂盒1.体外培养的细胞:离心处理采集的细胞悬液,吸弃上清液,立即提取DNA或在–20℃或–80℃下保存细胞。首选使用商业化提取试剂盒,如天根新鲜标本提取试剂盒(货号DP304)或Qiagen试剂盒。2.新鲜组织样品:新鲜采集的组织可以立即冰冻,并在–80℃下,或者液氮中储存。首选使用商业化提取试剂盒,如天根新鲜标本提取试剂盒(货号DP304),或Qiagen试剂盒。3.血液DNA提取:采用肝素或EDTA处理的血液样本可在2–8℃下储存数天,或在–20℃或–80℃下储存数周。此外,采用ACD溶液B(0.48%柠檬酸,1.32%柠檬酸钠,1.47%葡萄糖;每6ml血液使用1ml)处理的血液样本,在2–8℃下至少可储存5天,在–20℃下至少可储存1个月。如需长期储存,可准备血液细胞核,并在–20℃下储存。首选使用商业化提取试剂盒,如天根血液标本提取试剂盒(货号DP304)。4.血浆或血清游离DNA:样本可在2–8°C下储存数小时。如需长期储存,建议在–20℃或–80℃下冰冻。首选使用商业化提取试剂盒,如天根血清/血浆游离DNA提取试剂盒(货号DP339)或Qiagen公司试剂盒。5.干血斑基因组提取:建议使用商业化提取试剂盒,如天根新鲜标本提取试剂盒(货号DP334)6.石蜡包埋及病理组织切片:拿到样品后要尽快在4-10%的福尔马林中固定,固定时间以8-24小时为宜,时间过长导致基因组断裂,影响下游实验。选取保存时间不超过两年的样本,首选使用商业化提取试剂。如天根石蜡包埋组织DNA快速提取试剂盒(货号DP330)或QiagenFFPEDNAkit(货号56404)。7.质粒DNA:首选使用商业化提取试剂盒,一般小提试剂盒建议使用天根碱裂变质粒小提试剂盒(货号DP105),细胞转染用途等等要求较高的质粒提取建议使用Qiagen无内毒素质粒提取试剂盒。

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